Plasmide Double Nickase (h) RBM15B: sc-412040-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) RBM15B correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide RBM15B Double Nickase (h) et le plasmide RBM15B Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RBM15B. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) RBM15B | sc-412040-NIC | 20 µg | $410.00 |
RBM15B (RNA binding motif protein 15B) est une protéine nucléaire se liant à l’ARN, impliquée dans la régulation post‑transcriptionnelle de l’expression génique, notamment le contrôle de la maturation des pré‑ARNm et la stabilité des ARNm via des interactions avec les machineries d’épissage et de surveillance de l’ARN. En tant que membre de la famille RBM15, elle est associée à la régulation du devenir des transcrits et pourrait influencer des réseaux de signalisation épitranscriptomiques qui modulent le métabolisme de l’ARN. Des altérations du traitement de l’ARN et une activité déréglée des protéines liant l’ARN constituent des caractéristiques récurrentes dans les cancers ainsi que dans des troubles neurodéveloppementaux et des maladies immunitaires, ce qui fait de RBM15B un nœud utile pour disséquer des programmes d’expression génique pertinents pour la maladie. Les études de perturbation de RBM15B aident à cartographier des circuits de régulation de l’ARN affectant la prolifération cellulaire, la différenciation et les réponses au stress.
RBM15B Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RBM15B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RBM15B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RBM15B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RBM15B.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.