Plasmide Double Nickase (h) RBM15: sc-417289-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) RBM15 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide RBM15 Double Nickase (h) et le plasmide RBM15 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RBM15. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) RBM15 | sc-417289-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) RBM15 | sc-417289-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RBM15 (RNA binding motif protein 15) est un facteur nucléaire de liaison à l’ARN qui régule l’expression génique post-transcriptionnelle en contrôlant l’épissage alternatif, la stabilité de l’ARN et l’export de l’ARNm. Il agit au sein de complexes ribonucléoprotéiques et a été associé à des processus épigénétiques et liés aux modifications de l’ARN, notamment la modulation du métabolisme de l’ARN dépendant de la m6A via des interactions avec des composants essentiels du complexe « writer ». RBM15 contribue à la spécification des lignages et aux programmes hématopoïétiques, et la dérégulation du traitement de l’ARN associé à RBM15 a été impliquée dans des réseaux transcriptionnels oncogéniques, notamment des remaniements chromosomiques impliquant RBM15 dans les leucémies aiguës. Ces rôles font de RBM15 une cible utile pour analyser le couplage entre le traitement de l’ARN et les transitions d’état cellulaire dans des systèmes modèles humains.
RBM15 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RBM15 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RBM15. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RBM15. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RBM15.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.