Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RANK Plasmide Double Nickase (m): sc-423439-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RANK Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il RANK Double Nickase Plasmid (m) e il RANK Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Tnfrsf11a. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: RANK Antibody (H-7): sc-374360
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RANK Plasmide Double Nickase (m) | sc-423439-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Tnfrsf11a** codifica **RANK** (receptor activator of NF-κB), un membro della superfamiglia dei recettori del TNF che trasduce segnali dipendenti da RANKL per regolare la differenziazione degli osteoclasti, il rimodellamento osseo e la comunicazione tra cellule immunitarie. Dopo il legame con il ligando, RANK recluta proteine adattatrici come i **TRAF** per attivare le vie **NF-κB**, **MAPK** e **AP-1**, coordinando programmi di sopravvivenza e differenziazione nelle linee mieloidi. La segnalazione di RANK è strettamente collegata all’osteoimmunologia e la sua disregolazione influenza la perdita ossea infiammatoria e microambienti ematopoietici alterati. Queste funzioni rendono **Tnfrsf11a** un bersaglio chiave per analizzare l’accoppiamento tra segnalazione immunitaria e turnover scheletrico nei modelli murini.
RANK Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Tnfrsf11a nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Tnfrsf11a. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Tnfrsf11a. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Tnfrsf11a interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.