Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) RANK: sc-423439-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) RANK correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide RANK Double Nickase (m) et le plasmide RANK Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Tnfrsf11a. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: RANK Antibody (H-7): sc-374360
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) RANK | sc-423439-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Tnfrsf11a** code **RANK** (receptor activator of NF-κB), un membre de la superfamille des récepteurs du TNF qui transmet des signaux dépendants de **RANKL** afin de réguler la différenciation des ostéoclastes, le remodelage osseux et la communication entre cellules immunitaires. Après liaison du ligand, RANK recrute des protéines adaptatrices telles que les **TRAF** pour activer les voies **NF-κB**, **MAPK** et **AP-1**, coordonnant des programmes de survie et de différenciation au sein des lignées myéloïdes. La signalisation de RANK est étroitement liée à l’ostéo-immunologie, et sa dérégulation peut favoriser une perte osseuse inflammatoire ainsi que des altérations des microenvironnements hématopoïétiques. Ces fonctions font de **Tnfrsf11a** une cible clé pour disséquer le couplage entre signalisation immunitaire et renouvellement du squelette dans des modèles murins.
RANK Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Tnfrsf11a dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Tnfrsf11a. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Tnfrsf11a. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Tnfrsf11a.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.