Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Ran (m): sc-422594
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Ran Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Ran, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Ran Antibody (A-7): sc-271376
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Ran (m) | sc-422594 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Ran (protéine nucléaire apparentée à Ras) est une petite GTPase conservée qui établit un gradient RanGTP/RanGDP à travers l’enveloppe nucléaire afin d’assurer un transport nucléocytoplasmique directionnel via les voies dépendantes des importines et des exportines. Au-delà de l’import et de l’export nucléaires, Ran régule l’assemblage du fuseau mitotique, la fonction des centrosomes et la reformation de l’enveloppe nucléaire, reliant ainsi la dynamique du transport à la progression du cycle cellulaire. Par ces fonctions, Ran influence la régulation transcriptionnelle, la stabilité du génome et les réponses au stress, fréquemment perturbées dans les troubles prolifératifs et du neurodéveloppement ainsi que dans des phénotypes cellulaires associés au cancer. Dans les modèles murins, Ran est largement utilisé pour étudier des mécanismes fondamentaux de la mitose et du transport nucléaire qui façonnent la différenciation et l’homéostasie tissulaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Ran (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Ran dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Ran, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Ran à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Ran.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Ran pour l'étude de la signalisation de Ran, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Ran essentiels à la fonction de Ran
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Ran pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Ran plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Ran plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Ran. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Ran plasmide HDR (m) et le Ran (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Ran pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Ran définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.