Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Rad54 (h): sc-401750
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Rad54 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Rad54, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Rad54 Antibody (F-11): sc-374598
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Rad54 (h) | sc-401750 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
RAD54L code l’ATPase humaine Rad54 dépendante de l’ADN, un remodelleur de la chromatine de la famille SWI2/SNF2 qui coopère avec RAD51 pour favoriser la recombinaison homologue. Rad54 stabilise et remanie les filaments présynaptiques de RAD51, stimule l’invasion de brin et soutient la réparation des cassures double brin de l’ADN en situation de stress réplicatif, contribuant à l’intégrité du génome et au bon fonctionnement des points de contrôle du cycle cellulaire. La protéine agit au sein des réseaux de recombinaison homologue et de réponse aux dommages de l’ADN, en interagissant avec des facteurs clés de réparation afin de réguler le traitement des intermédiaires de recombinaison. Une activité altérée de RAD54L est associée à des phénotypes d’instabilité chromosomique fréquemment étudiés en biologie du cancer et dans des modèles de réparation de l’ADN déficiente.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Rad54 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène RAD54L dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du RAD54L, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert RAD54L à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Rad54.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en RAD54L pour l'étude de la signalisation de Rad54, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de RAD54L essentiels à la fonction de Rad54
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de RAD54L pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Rad54 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Rad54 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus RAD54L. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Rad54 plasmide HDR (h) et le Rad54 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie RAD54L pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles RAD54L définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.