Plasmide Double Nickase (h) Rac 2: sc-401157-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Rac 2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Rac 2 Double Nickase (h) et le plasmide Rac 2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RAC2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Rac 2 Antibody (3B8): sc-293429
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Rac 2 | sc-401157-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Rac 2 | sc-401157-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RAC2 code Rac2, une petite GTPase de la famille Rho enrichie dans les cellules hématopoïétiques, qui alterne entre des états liés au GDP et au GTP afin de coordonner le remodelage du cytosquelette d’actine, la polarité cellulaire et la migration dirigée. Rac2 intègre des signaux en aval des récepteurs aux chimiokines, des intégrines et des récepteurs Fc pour réguler la phagocytose, la dégranulation et la production d’espèces réactives de l’oxygène via des voies telles que la signalisation PI3K et l’activation de la NADPH oxydase. Dans les cellules immunitaires, Rac2 contribue au trafic leucocytaire, à l’adhérence et aux réponses antimicrobiennes, reliant ainsi son activité à des programmes de signalisation inflammatoire. Une fonction ou une expression dérégulée de RAC2 est pertinente dans les études portant sur les immunodéficiences, les comportements anormaux des neutrophiles/lymphocytes et les mécanismes des maladies hématologiques où la dynamique du cytosquelette et l’explosion oxydative sont perturbées.
Rac 2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RAC2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RAC2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RAC2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RAC2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.