Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Rab 18 (h): sc-417193
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Rab 18 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Rab 18, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Rab 18 Antibody (D-5): sc-393168
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Rab 18 (h) | sc-417193 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
RAB18 code Rab18, une petite GTPase de la famille Rab qui régule le trafic membranaire intracellulaire, avec des rôles majeurs à l’interface entre le réticulum endoplasmique (RE) et les gouttelettes lipidiques. Rab18 coordonne le transport vésiculaire, l’arrimage des organites et la morphologie du RE en alternant entre des états liés au GDP et au GTP, et via des interactions avec des effecteurs associés aux membranes. La perturbation du trafic dépendant de RAB18 peut modifier l’homéostasie lipidique, la dynamique de la voie de sécrétion et des processus liés à l’autophagie. Des études génétiques et fonctionnelles ont relié le dysfonctionnement de RAB18 à des phénotypes neurodéveloppementaux et à des réponses au stress cellulaire, soutenant sa pertinence dans des modèles de biologie des maladies neurologiques et des voies associées au métabolisme.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Rab 18 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène RAB18 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du RAB18, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert RAB18 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Rab 18.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en RAB18 pour l'étude de la signalisation de Rab 18, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de RAB18 essentiels à la fonction de Rab 18
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de RAB18 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Rab 18 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Rab 18 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus RAB18. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Rab 18 plasmide HDR (h) et le Rab 18 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie RAB18 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles RAB18 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.