Plasmide Double Nickase (h) PTPN21: sc-407466-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PTPN21 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PTPN21 Double Nickase (h) et le plasmide PTPN21 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PTPN21. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PTPN21 | sc-407466-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PTPN21 | sc-407466-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PTPN21 code une phosphatase à tyrosine non réceptrice qui module la transduction du signal en déphosphorylant des résidus de phosphotyrosine sur des protéines cibles, ajustant ainsi l’amplitude et la durée des voies liées aux récepteurs et à l’adhérence. Elle a été impliquée dans la coordination du remodelage du cytosquelette, de la motilité cellulaire et du trafic membranaire via des interactions avec des protéines d’échafaudage et des composants de l’endocytose, influençant des processus tels que la dynamique des adhérences focales et le renouvellement des récepteurs aux facteurs de croissance. Par ces connexions de voies, PTPN21 est fréquemment étudiée dans des contextes où l’équilibre de la phosphorylation sur tyrosine influe sur la prolifération, la migration et les réponses au stress cellulaire. Une régulation altérée de l’activité phosphatase et des réseaux de signalisation sur tyrosine impliquant PTPN21 a été associée à des états de signalisation oncogénique et à d’autres maladies caractérisées par une dérégulation de la signalisation et de l’adhérence cellulaires.
PTPN21 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PTPN21 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PTPN21. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PTPN21. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PTPN21.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.