PTPN21 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407466

Descripción general

PTPN21 codifica una fosfatasa tirosina de proteínas citosólica que modula la señalización dependiente de la fosforilación al desfosforilar sustratos específicos y proteínas de andamiaje. Mediante la regulación de las salidas de los receptores tirosina quinasa y de las vías aguas abajo que controlan la dinámica del citoesqueleto, la adhesión y el tráfico vesicular, PTPN21 puede influir en la motilidad celular y en la amplitud de la señal. Su actividad se cruza con redes que gobiernan las respuestas a factores de crecimiento y la señalización de estrés, lo que la hace relevante para estudios de transformación celular y fenotipos invasivos. La desregulación de la señalización de fosfatasas en la que participa PTPN21 se ha implicado en contextos como la reprogramación de la señalización asociada al cáncer y el comportamiento migratorio alterado.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PTPN21 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PTPN21 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PTPN21 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PTPN21 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PTPN21.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PTPN21 para la investigación de la señalización de PTPN21, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PTPN21 críticos para la función de PTPN21
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PTPN21 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PTPN21 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PTPN21 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PTPN21. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PTPN21 (h) y el plásmido HDR PTPN21 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PTPN21 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PTPN21 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.