PSK2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432149
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- PSK2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico PSK2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PSK2 Anticuerpo (22): sc-136094
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
PSK2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-432149 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El Taok1 de ratón codifica la quinasa de serina/treonina PSK2, una MAP3K de la familia STE20 que acopla señales del citoesqueleto a vías de señalización sensibles al estrés. PSK2 participa en la regulación de la cascada MAPK, incluidas las rutas de JNK y p38, y contribuye al desarrollo neuronal, al crecimiento axonal y a la organización sináptica mediante efectos sobre la dinámica de los microtúbulos y la actina. La actividad de Taok1 influye en programas relacionados con el ciclo celular y la apoptosis, conectando la señalización por quinasas con la homeostasis celular. La desregulación de redes asociadas a TAOK1 se ha implicado en fenotipos del neurodesarrollo y en otros contextos en los que la alteración de la señalización MAPK y la remodelación del citoesqueleto son mecanismos patogénicos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO PSK2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Taok1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Taok1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Taok1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PSK2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Taok1 para la investigación de la señalización de PSK2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Taok1 críticos para la función de PSK2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Taok1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido PSK2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido PSK2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Taok1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PSK2 (m) y el plásmido HDR PSK2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Taok1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Taok1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.