Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PSGL-1双切口酶质粒(h): sc-401534-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PSGL-1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- PSGL-1双切酶质粒（h）和PSGL-1双切酶质粒（h2）编码针对SELPLG的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PSGL-1: sc-13535，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PSGL-1双切口酶质粒(h) | sc-401534-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PSGL-1双切口酶质粒(h2) | sc-401534-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SELPLG 编码 P-选择素糖蛋白配体-1（PSGL-1）。PSGL-1 是一种黏蛋白样、带唾液酸化和岩藻糖化修饰的细胞表面糖蛋白，表达于大多数白细胞上，可通过与 P、E 和 L 选择素结合介导白细胞在活化内皮上的捕获（tethering）与滚动（rolling）。通过其在选择素依赖性黏附中的作用，PSGL-1 协调白细胞募集、穿越内皮（transmigration）以及炎症细胞迁移的早期步骤，并与趋化因子信号和整合素激活相整合，以稳定白细胞-内皮相互作用。PSGL-1 还参与白细胞与血小板之间的串话，并可通过调控依赖细胞接触的信号传导影响下游免疫激活程序。PSGL-1–选择素轴的失调与慢性炎症性疾病、血管炎症、与血栓相关的白细胞募集以及肿瘤相关转移等研究背景有关，因此 SELPLG 是开展黏附与免疫调控机制研究的一个有用靶点。
PSGL-1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 SELPLG 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SELPLG内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏SELPLG的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了SELPLG基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。