Plasmide Double Nickase (h) PRX VI: sc-401549-NIC

PRDX6 code la peroxyrédoxine 6 (PRX VI), une enzyme antioxydante bifonctionnelle dotée d’activités glutathion peroxydase et phospholipase A2, qui contribuent au maintien de l’équilibre rédox cellulaire et de l’homéostasie des phospholipides membranaires. En limitant l’accumulation de peroxyde d’hydrogène et d’hydroperoxydes lipidiques, PRX VI module la signalisation liée au stress oxydant, les réponses inflammatoires et les voies de survie cellulaire, notamment des processus associés à la fonction mitochondriale et au métabolisme lipidique. Des altérations de l’expression ou de l’activité de PRDX6 ont été associées à une dérégulation de la gestion des espèces réactives de l’oxygène et à la peroxydation lipidique, des caractéristiques fréquemment observées dans les troubles inflammatoires, la neurodégénérescence et la biologie des cancers. En tant que nœud de réparation rédox et lipidique, PRX VI est souvent étudiée dans des modèles de lésion oxydative, de susceptibilité à la ferroptose et de signalisation adaptative au stress.

PRX VI Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PRDX6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PRDX6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PRDX6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PRDX6.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.