Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Progesterone Receptor Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422214
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Progesterone Receptor El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Progesterone Receptor, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Progesterone Receptor Anticuerpo (A-2): sc-398898
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Progesterone Receptor Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422214 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Pgr codifica el receptor de progesterona del ratón, un receptor nuclear de hormonas activado por ligando que funciona como factor de transcripción y controla programas génicos aguas abajo de la progesterona. Tras la unión de la hormona, PGR forma dímeros, se transloca al núcleo y regula la accesibilidad de la cromatina y el reclutamiento de la ARN polimerasa II para coordinar la diferenciación epitelial, la decidualización, la implantación y el desarrollo de la glándula mamaria. La señalización de PGR interactúa con las vías del receptor de estrógenos, las cascadas MAPK/PI3K y complejos de correpuladores para ajustar finamente la progresión del ciclo celular, la modulación inmunitaria y la remodelación tisular. La actividad desregulada de Pgr o un equilibrio alterado de isoformas del receptor se utiliza ampliamente para modelar fenotipos endocrinos reproductivos y cambios dependientes de hormonas relevantes para la biología uterina y la fisiología mamaria.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Progesterone Receptor (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Pgr en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Pgr junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Pgr tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Progesterone Receptor.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Pgr para la investigación de la señalización de Progesterone Receptor, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Pgr críticos para la función de Progesterone Receptor
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Pgr para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Progesterone Receptor CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Progesterone Receptor CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Pgr. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Progesterone Receptor (m) y el plásmido HDR Progesterone Receptor (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Pgr para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Pgr definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.