PRMT7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-431946

Descripción general

Prmt7 codifica PRMT7, una metiltransferasa de arginina de proteínas de tipo III que cataliza la dimetilación simétrica en residuos de arginina de sustratos histónicos y no histónicos, contribuyendo así a moldear la organización de la cromatina y los programas transcripcionales. La actividad de PRMT7 se integra con la regulación epigenética, el procesamiento de ARN y las vías de señalización adaptativas al estrés, lo que influye en la especificación de linaje y el mantenimiento de la identidad celular en sistemas de mamíferos. En modelos murinos, Prmt7 se ha vinculado con la regulación de la función de las células madre musculares, el desarrollo neuronal y respuestas transcripcionales relacionadas con el sistema inmunitario, mediante la modulación de la accesibilidad de la cromatina y de redes de expresión génica. La metilación dependiente de PRMT7 desregulada se ha asociado con estados de diferenciación alterados y fenotipos relevantes para trastornos del desarrollo y metabólicos, lo que la convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos del control epigenético.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PRMT7 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Prmt7 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Prmt7 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Prmt7 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PRMT7.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Prmt7 para la investigación de la señalización de PRMT7, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Prmt7 críticos para la función de PRMT7
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Prmt7 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PRMT7 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido PRMT7 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Prmt7. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PRMT7 (m) y el plásmido HDR PRMT7 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Prmt7 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Prmt7 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.