PRMT7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-417516

Übersicht

PRMT7 kodiert eine Protein-Arginin-Methyltransferase vom Typ III, die die Monomethylierung von Argininresten an Histonen und nicht-histonischen Substraten katalysiert und damit die Chromatinzugänglichkeit sowie Protein-Protein-Interaktionen prägt. Durch die Regulation epigenetischer Programme beeinflusst PRMT7 die Transkriptionskontrolle, den Zellzyklusfortschritt, DNA-Schadensantworten und die differenzierungsassoziierte Genexpression. Die PRMT7-Aktivität ist in umfassendere Arginin-Methylierungsnetzwerke eingebunden und kann Signalausgänge modulieren, die mit Stressadaptation und metabolischer Umprogrammierung verknüpft sind. Eine dysregulierte PRMT7-Expression oder -Funktion wurde in krebsrelevanten Kontexten mit veränderter Proliferation und Linienplastizität in Verbindung gebracht, was ihre Untersuchung in der onkogenen Epigenetik und in Modellen transkriptioneller Abhängigkeiten unterstützt.

Das PRMT7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des PRMT7-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des PRMT7-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von PRMT7 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die PRMT7-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von PRMT7-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der PRMT7-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf PRMT7-Exone abzielen, die für die PRMT7-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere PRMT7-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom PRMT7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom PRMT7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des PRMT7-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das PRMT7 HDR-Plasmid (h) und PRMT7 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von PRMT7-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten PRMT7-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.