PRMT3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406688

Übersicht

PRMT3 kodiert eine Protein-Arginin-Methyltransferase vom Typ I, die an Argininresten von Proteinsubstraten eine asymmetrische Dimethylierung katalysiert und damit zur posttranslationalen Regulation von Proteininteraktionen und des RNA-Stoffwechsels beiträgt. PRMT3 ist überwiegend im Zytoplasma lokalisiert und wurde mit der Regulation der Ribosomenbiogenese und der Translation in Verbindung gebracht, einschließlich der Methylierung ribosomaler Proteine, wodurch Proteostase und zelluläre Wachstumsprogramme beeinflusst werden. Durch Crosstalk mit Signal- und Stressantwortwegen kann die PRMT3-Aktivität Genexpressionsausgänge indirekt über die Translationskontrolle und den Aufbau von Ribonukleoproteinkomplexen mitgestalten. Fehlregulierte Argininmethylierung und veränderte Aktivität der PRMT-Familie sind häufig mit krebsassoziierten Phänotypen und anderen Erkrankungen verbunden, die mit aberranter RNA-Verarbeitung und Proteinsynthese einhergehen.

Das PRMT3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des PRMT3-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des PRMT3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von PRMT3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die PRMT3-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von PRMT3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der PRMT3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf PRMT3-Exone abzielen, die für die PRMT3-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere PRMT3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom PRMT3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom PRMT3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des PRMT3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das PRMT3 HDR-Plasmid (h) und PRMT3 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von PRMT3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten PRMT3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.