Plasmide Double Nickase (h) PRMT1: sc-402249-NIC

PRMT1 code la protéine arginine méthyltransférase 1, la principale PRMT de type I responsable de la diméthylation asymétrique des résidus d’arginine sur les histones ainsi que sur de nombreuses protéines de liaison à l’ARN et de signalisation. En régulant l’accessibilité de la chromatine, la transcription, le traitement de l’ARN et les réponses aux dommages de l’ADN, PRMT1 contribue à des processus fondamentaux tels que le contrôle du cycle cellulaire, l’apoptose et la différenciation. La méthylation dépendante de PRMT1 s’articule avec les voies épigénétiques et de réponse au stress en modulant les interactions protéine–protéine et la localisation subcellulaire de régulateurs clés. Une activité dérégulée de PRMT1 et des profils de méthylation de l’arginine anormaux sont fréquemment étudiés dans le cadre de programmes transcriptionnels oncogéniques, de l’inflammation et des mécanismes des maladies neurodégénératives.

PRMT1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PRMT1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PRMT1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PRMT1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PRMT1.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.