Presenilin 2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-403532-LAC

PSEN2 kodiert Presenilin 2, eine katalytische Kernkomponente des γ‑Sekretase‑Komplexes, der die intramembranäre Proteolyse mehrerer Typ‑I‑Membranproteine vermittelt, darunter APP und Notch‑Rezeptoren. Durch regulierte Spaltungsereignisse trägt Presenilin 2 zur Notch‑Signalübertragung, zur APP‑Prozessierung und zu nachgeschalteten Effekten auf Zellschicksalsentscheidungen, synaptische Funktion und Entzündungsreaktionen bei. PSEN2 beeinflusst zudem den endolysosomalen Transport, die Calcium‑Homöostase und die Mitochondrienfunktion und verknüpft damit die γ‑Sekretase‑Aktivität mit Proteostase‑ und zellulären Stresssignalwegen. Genetische und funktionelle Veränderungen in PSEN2 wurden mit Mechanismen neurodegenerativer und neuroinflammatorischer Erkrankungen in Verbindung gebracht, wodurch es ein wichtiges Ziel für signalwegfokussierte Studien in neuronalen und glialen Systemen darstellt.

Presenilin 2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente PSEN2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Presenilin 2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der PSEN2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Presenilin 2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen PSEN2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.