Plasmide CRISPR/Cas9 KO PRDM5 (m): sc-427796
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- PRDM5 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique PRDM5, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PRDM5 Antibody (A-12): sc-376277
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO PRDM5 (m) | sc-427796 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Prdm5 code pour PRDM5, un régulateur transcriptionnel contenant un domaine PR/SET, qui module des programmes d’expression génique impliqués dans la différenciation, l’organisation de la matrice extracellulaire et le contrôle du cycle cellulaire. PRDM5 a été associé à la régulation épigénétique via des interactions avec la machinerie de modification de la chromatine, influençant la répression ou l’activation transcriptionnelle sur des loci cibles. Dans les modèles murins, l’activité de Prdm5 a été reliée à des processus de développement du tissu conjonctif et de l’os, ce qui reflète son rôle dans la régulation de réseaux de gènes de matrice et de structure. Des altérations de la fonction de PRDM5 ont été étudiées dans le contexte d’un contrôle de la croissance déréglé et d’un déséquilibre épigénétique pertinents pour la biologie tumorale et des états transcriptionnels de type fibrotique.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO PRDM5 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Prdm5 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Prdm5, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Prdm5 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine PRDM5.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Prdm5 pour l'étude de la signalisation de PRDM5, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Prdm5 essentiels à la fonction de PRDM5
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Prdm5 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le PRDM5 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le PRDM5 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Prdm5. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le PRDM5 plasmide HDR (m) et le PRDM5 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Prdm5 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Prdm5 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.