Plasmide Double Nickase (h) PRDM10: sc-412741-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PRDM10 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PRDM10 Double Nickase (h) et le plasmide PRDM10 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PRDM10. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PRDM10 Antibody (48AT1224.90.46): sc-130240
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PRDM10 | sc-412741-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PRDM10 | sc-412741-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PRDM10 (PR domain containing 10) est un régulateur transcriptionnel nucléaire appartenant à la famille des domaines PR/SET, qui contribue à coordonner des programmes d’expression génique liés à l’organisation de la chromatine et au maintien de l’état cellulaire. Grâce à ses interactions avec des partenaires de liaison à l’ADN et des complexes associés à la chromatine, PRDM10 est bien placé pour influencer des réseaux transcriptionnels qui gouvernent la prolifération, la différenciation et des circuits régulateurs spécifiques de lignée. Une activité altérée de la famille PRDM a été associée à une dérégulation du contrôle épigénétique dans des contextes cancéreux et développementaux, faisant de PRDM10 un nœud utile pour l’étude des mécanismes transcriptionnels et dépendants de la chromatine. L’étude de la fonction de PRDM10 soutient des analyses à l’échelle des voies de la régulation génique, de la stabilité épigénomique et des sorties transcriptionnelles dépendantes du contexte dans les cellules humaines.
PRDM10 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PRDM10 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PRDM10. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PRDM10. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PRDM10.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.