Plasmide Double Nickase (h) PPARγ: sc-400030-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PPARγ correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PPARγ Double Nickase (h) et le plasmide PPARγ Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PPARG. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PPARγ Antibody (E-8): sc-7273
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PPARγ | sc-400030-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PPARγ | sc-400030-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PPARG code le récepteur activé par les proliférateurs de peroxysomes gamma (PPARγ), un récepteur nucléaire activé par un ligand qui forme un hétérodimère avec RXR afin de réguler des programmes transcriptionnels contrôlant l’adipogenèse, la captation et le stockage des lipides, ainsi que la sensibilité à l’insuline. PPARγ intègre des signaux métaboliques et inflammatoires en modulant des voies telles que le métabolisme des acides gras, l’homéostasie du glucose et la polarisation des macrophages, influençant la signalisation des cytokines et le remodelage tissulaire. Une activité ou une expression altérée de PPARG est associée à des dysfonctionnements métaboliques, notamment l’obésité, l’insulinorésistance et la dyslipidémie, et fait également l’objet d’études dans des contextes tels que la stéatose hépatique et les troubles inflammatoires. En tant que nœud central de la transcription, PPARG est fréquemment étudié pour cartographier les réseaux de régulation génique et les transitions d’état métabolique dans des modèles cellulaires humains.
PPARγ Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PPARG dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PPARG. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PPARG. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PPARG.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.