POL H CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h2): sc-401794-KO-2

개요

POLH는 DNA 중합효소 에타(Pol η)를 암호화하며, Pol η는 Y-패밀리 전이손상 합성(translesion synthesis, TLS) 중합효소로서 DNA 복제 과정에서 자외선(UV)으로 유도된 시클로부테인 피리미딘 이합체(CPD)를 정확하게 우회하도록 돕습니다. POLH는 DNA 손상 내성과 복제 스트레스 반응에서 기능하며, 증식세포핵항원(PCNA)과 협력하고 유비퀴틴 의존적 스위칭을 통해 복제 중합효소에서 특수 TLS 중합효소로의 전환을 조정합니다. Pol η의 소실 또는 기능 이상은 유전체 안정성을 저해하고 UV 돌연변이율을 증가시키며, 이에 따라 POLH는 색소성 건피증 변이형(XP-V) 및 DNA 수리 결함에 의해 유발되는 더 광범위한 발암 기전과 연관됩니다. 또한 POLH는 뉴클레오타이드 절제수리(NER)와 연관된 병변 처리와 S기 체크포인트 적응의 교차점에 위치하므로, 돌연변이 시그니처와 복제 포크 동역학을 조절하는 경로에서 자주 연구됩니다.

POL H CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)는 human 세포주에서 POLH 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 POLH 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 POLH의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 POL H 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 POL H 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 POLH 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• POL H 기능에 중요한 POLH 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 POLH 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• POL H CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 POL H CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 POLH 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  POL H HDR 플라스미드 (h) 및 POL H HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 POLH 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 POLH 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.