Partículas Lentivirales de Activación (h) PLC γ2: sc-400451-LAC
- Especies Diana: human
- 200 µl de Partículas Lentivirales de Activación CRISPR/dCas listas para usar
- Partículas Lentivirales de Acitvación (h) PLC γ2 es un sistema de activación de la trascripción por mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen determinado a través de la tranducción lentiviral de las células
- Partículas Lentivirales de Acitvación (h) PLC γ2 incluyen los siguientes elementos activadores SAM: plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada, (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y un plásmido que codifica la secuencia de diana específica de 20 nt de ARN. También contienen genes de resistencia a blasticidina, higromicina y puromicina.
- El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación génica
- Los gRNA codificados por el PLC γ2 Plásmido de activación lentiviral (h) y el PLC γ2 Plásmido de activación lentiviral (h2) se dirigen a regiones reguladoras distintas del promotor PLCG2. Puede que haya uno o ambos diseños disponibles
- Tras la transfección, la eficacia de la activación génica puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PLC γ2 Anticuerpo (B-10): sc-5283
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Partículas Lentivirales de Activación (h) PLC γ2 | sc-400451-LAC | 200 µl | $455.00 |
El PLCG2 humano codifica la fosfolipasa Cγ2 (PLCγ2), una enzima de transducción de señales que hidroliza PIP2 para generar IP3 y DAG, movilizando así el Ca2+ intracelular y activando programas dependientes de PKC. PLCγ2 actúa aguas abajo de la señalización basada en motivos tirosina de inmunorreceptores y de las tirosina quinasas receptoras, integrando señales del receptor de células B, los receptores Fc y otros complejos mediados por adaptadores para regular la activación, las respuestas de citocinas y la remodelación del citoesqueleto. A través de sus funciones en el flujo de calcio y en vías vinculadas a MAPK/NF-κB, PLCG2 es central para la función de las células inmunitarias innatas y adaptativas. Las alteraciones genéticas y la señalización desregulada de PLCγ2 se han asociado con disfunción inmunitaria y fenotipos inflamatorios, lo que la convierte en un nodo relevante para estudios mecanísticos de redes de señalización inmunitaria.
Las partículas de activación lentiviral PLC γ2 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de PLCG2 en una gama más amplia de tipos de células humanas.
Las partículas de activación lentiviral PLC γ2 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción PLCG2, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de PLC γ2. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo PLCG2 y la arquitectura reguladora.
El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.