Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
PLC γ1 Plasmide Double Nickase (h): sc-400472-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- PLC γ1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il PLC γ1 Double Nickase Plasmid (h) e il PLC γ1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira PLCG1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: PLC γ1 Antibody (E-12): sc-7290
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
PLC γ1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400472-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PLC γ1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400472-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PLCG1 codifica la fosfolipasi Cγ1 (PLCγ1), un enzima di segnalazione prossimale al recettore che idrolizza il PIP2 generando IP3 e diacilglicerolo, promuovendo la mobilizzazione intracellulare di Ca2+ e l'attivazione della proteina chinasi C. PLCγ1 viene attivata a valle dei recettori tirosin-chinasici e dei recettori immunitari, integrando segnali che regolano proliferazione, differenziamento, rimodellamento del citoscheletro e migrazione cellulare. Questo asse interagisce con la segnalazione PI3K–AKT e MAPK/ERK e modula gli output trascrizionali tramite effettori dipendenti dal Ca2+. Un'attività deregolata di PLCG1 è stata implicata in contesti di segnalazione oncogenica e di attivazione aberrante delle cellule immunitarie, a supporto della sua rilevanza negli studi meccanicistici della trasduzione del segnale.
PLC γ1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PLCG1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PLCG1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PLCG1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PLCG1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.