Placental lactogen Iα Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422276

Descripción general

Prl3d1 codifica el lactógeno placentario Iα del ratón, una hormona de la familia de la prolactina/hormona del crecimiento producida predominantemente por linajes de trofoblasto durante el embarazo. El lactógeno placentario Iα activa la señalización del receptor de prolactina e influye en JAK2–STAT5 y en programas transcripcionales relacionados que coordinan las adaptaciones metabólicas maternas y favorecen el crecimiento fetal mediante efectos endocrinos y paracrinos. En la placenta, Prl3d1 contribuye a la diferenciación del trofoblasto, a la función endocrina placentaria y a la regulación de la asignación de nutrientes en la interfaz materno-fetal. La desregulación de las vías del lactógeno placentario se investiga con frecuencia en modelos de placentación alterada, restricción del crecimiento fetal y fenotipos metabólicos asociados al embarazo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Placental lactogen Iα (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Prl3d1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Prl3d1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Prl3d1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Placental lactogen Iα.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Prl3d1 para la investigación de la señalización de Placental lactogen Iα, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Prl3d1 críticos para la función de Placental lactogen Iα
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Prl3d1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Placental lactogen Iα CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Placental lactogen Iα CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Prl3d1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Placental lactogen Iα (m) y el plásmido HDR Placental lactogen Iα (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Prl3d1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Prl3d1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.