Plasmide CRISPR/Cas9 KO PI 4-kinase α (h): sc-406508
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- PI 4-kinase α Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique PI 4-kinase α, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO PI 4-kinase α (h) | sc-406508 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
PI4KA code la phosphatidylinositol 4-kinase alpha (PI 4-kinase α), une kinase lipidique qui produit le phosphatidylinositol 4-phosphate (PI4P), un précurseur clé des phosphoinositides qui organisent l’identité membranaire et la signalisation. La PI 4-kinase α maintient les réservoirs de PI4P de l’appareil de Golgi et de la membrane plasmique, influençant le trafic vésiculaire, la transduction de signaux dépendante des phosphoinositides et la dynamique du cytosquelette. Par son impact sur l’homéostasie des lipides membranaires, PI4KA est pertinente pour l’étude des réponses au stress cellulaire et du remodelage des compartiments endomembranaires, et une altération du métabolisme des phosphoinositides a été associée à divers mécanismes pathologiques humains, notamment des processus neurodéveloppementaux et oncogéniques.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO PI 4-kinase α (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène PI4KA dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du PI4KA, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert PI4KA à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine PI 4-kinase α.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en PI4KA pour l'étude de la signalisation de PI 4-kinase α, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de PI4KA essentiels à la fonction de PI 4-kinase α
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de PI4KA pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le PI 4-kinase α plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le PI 4-kinase α plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus PI4KA. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le PI 4-kinase α plasmide HDR (h) et le PI 4-kinase α (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie PI4KA pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles PI4KA définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.