Les cellules A-431 traitées à l'EGF ont été traitées à l'aide du système de purification des protéines PhosphoCruzTM sc-24964. Fig. 1: Les blots ont été sondés avec l'anticorps phosphotyrosine sc-508, détectant l'EGFR phosphorylé à la tyrosine. Couloirs A/B: fractions de colonne non liées. Couloirs C/D: fractions de colonne liées (enrichies en phosphoprotéines). Couloirs E/F: lysats de cellules entières préparés à partir de cultures non traitées et traitées à l'EGF, respectivement. Fig. 2: Les mêmes échantillons que ceux de la Fig. 1 ont été analysés avec l'anticorps contre la HSP 60, sc-13115.
Les cellules A-431 traitées à l'EGF ont été traitées à l'aide du système de purification des protéines PhosphoCruzTM sc-24964. Fig. 1: Les blots ont été sondés avec l'anticorps phosphotyrosine sc-508, détectant l'EGFR phosphorylé à la tyrosine. Couloirs A/B: fractions de colonne non liées. Couloirs C/D: fractions de colonne liées (enrichies en phosphoprotéines). Couloirs E/F: lysats de cellules entières préparés à partir de cultures non traitées et traitées à l'EGF, respectivement. Fig. 2: Les mêmes échantillons que ceux de la Fig. 1 ont été analysés avec l'anticorps contre la HSP 60, sc-13115.
Les cellules A-431 traitées à l'EGF ont été traitées à l'aide du système de purification des protéines PhosphoCruzTM sc-24964. Fig. 1: Les blots ont été sondés avec l'anticorps phosphotyrosine sc-508, détectant l'EGFR phosphorylé à la tyrosine. Couloirs A/B: fractions de colonne non liées. Couloirs C/D: fractions de colonne liées (enrichies en phosphoprotéines). Couloirs E/F: lysats de cellules entières préparés à partir de cultures non traitées et traitées à l'EGF, respectivement. Fig. 2: Les mêmes échantillons que ceux de la Fig. 1 ont été analysés avec l'anticorps contre la HSP 60, sc-13115.
PhosphoCruz™ Protein Purification System: sc-24964
affinity purification system devised to enrich/isolate phosphoproteins from cell lysates and tissue extracts for phosphorylation studies; proteins that carry a phosphate group are retained on the column while non-phosphorylated and undesired contaminants pass through
typical phosphoenriched protein yield is 5-10% of total protein
contains materials required for six individual phosphoprotein enrichment procedures including six single-use columns, 100 ml 2X Binding/Wash Buffer, 30 ml Eluting Buffer, 150 µl each Phosphatase Inhibitor Cocktails 1 and 2, and six ultrafiltration concentrators for concentrating phosphoenriched protein post-purification