PHF24 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409845

Descripción general

PHF24 (proteína 24 con dedo PHD) es una proteína nuclear que contiene un dedo de zinc tipo PHD, un motivo que con frecuencia participa en el reconocimiento de modificaciones de histonas y en la coordinación de la regulación de la transcripción dependiente de la cromatina. Al vincular el estado epigenético con programas de expresión génica, PHF24 está en posición de influir en la diferenciación neuronal, la señalización sináptica y las respuestas transcripcionales dependientes de la actividad que dan forma a la identidad celular. La regulación alterada de los lectores de cromatina y de las redes de control transcripcional se ha implicado en fenotipos del neurodesarrollo y neuropsiquiátricos, lo que hace que PHF24 sea relevante para estudios mecanísticos de vías asociadas al cerebro. Desentrañar la función de PHF24 puede ayudar a aclarar cómo la interpretación epigenética se integra con los circuitos transcripcionales y los fenotipos celulares posteriores.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PHF24 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PHF24 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PHF24 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PHF24 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PHF24.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PHF24 para la investigación de la señalización de PHF24, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PHF24 críticos para la función de PHF24
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PHF24 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PHF24 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PHF24 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PHF24. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PHF24 (h) y el plásmido HDR PHF24 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PHF24 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PHF24 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.