Plasmide CRISPR/Cas9 KO PHF24 (h): sc-409845

Présentation

PHF24 (PHD finger protein 24) est une protéine nucléaire qui contient un doigt de zinc de type PHD, un motif fréquemment impliqué dans la reconnaissance des modifications des histones et dans la coordination d’une régulation de la transcription dépendante de la chromatine. En reliant l’état épigénétique aux programmes d’expression génique, PHF24 est en mesure d’influencer la différenciation neuronale, la signalisation synaptique et les réponses transcriptionnelles dépendantes de l’activité qui façonnent l’identité cellulaire. Une régulation altérée des lecteurs de la chromatine et des réseaux de contrôle transcriptionnel a été impliquée dans des phénotypes neurodéveloppementaux et neuropsychiatriques, ce qui rend PHF24 pertinent pour des études mécanistiques des voies associées au cerveau. L’étude de la fonction de PHF24 peut aider à clarifier comment l’interprétation épigénétique s’articule avec les circuits transcriptionnels et les phénotypes cellulaires en aval.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO PHF24 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène PHF24 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du PHF24, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert PHF24 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine PHF24.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en PHF24 pour l'étude de la signalisation de PHF24, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de PHF24 essentiels à la fonction de PHF24
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de PHF24 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le PHF24 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le PHF24 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus PHF24. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le PHF24 plasmide HDR (h) et le PHF24 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie PHF24 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles PHF24 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.