Plasmide Double Nickase (h) PHF14: sc-411313-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PHF14 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PHF14 Double Nickase (h) et le plasmide PHF14 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PHF14. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PHF14 | sc-411313-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PHF14 | sc-411313-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PHF14 (PHD finger protein 14) est un facteur nucléaire associé à la chromatine, impliqué dans la régulation transcriptionnelle par la reconnaissance de marques d’histones et la modulation de l’accessibilité de la chromatine. Il participe à des programmes de régulation génique qui influencent la prolifération cellulaire, la différenciation et des états transcriptionnels spécifiques de lignée, ce qui le relie aux voies de contrôle du développement et de la régulation épigénétique. Une activité altérée de PHF14 a été associée à des réseaux d’expression dérégulés pertinents pour la signalisation oncogénique et le remodelage tissulaire, ce qui en fait une cible d’intérêt dans les études de biologie tumorale et de plasticité cellulaire. Dans les cellules humaines, PHF14 constitue un point d’entrée pratique pour analyser comment les « lecteurs » de la chromatine façonnent les sorties transcriptionnelles et les phénotypes en aval.
PHF14 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PHF14 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PHF14. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PHF14. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PHF14.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.