Plasmide Double Nickase (h) PHF10: sc-410593-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PHF10 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PHF10 Double Nickase (h) et le plasmide PHF10 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PHF10. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PHF10 | sc-410593-NIC | 20 µg | $410.00 |
PHF10 (protéine à doigt PHD 10) est un facteur associé à la chromatine, impliqué dans le remodelage de la chromatine dépendant de l’ATP et le contrôle transcriptionnel. Il est lié à la forme PBAF (Polybromo-associated BRG1-associated factor) du complexe SWI/SNF, contribuant à la régulation de programmes d’expression génique qui influencent la prolifération cellulaire, la différenciation et la spécification des lignages. Par ses rôles dans l’accessibilité de la chromatine et la fonction des promoteurs/activateurs (enhancers), PHF10 aide à coordonner des réseaux transcriptionnels du développement et de réponse au stress. La dérégulation de composants associés à SWI/SNF, y compris des assemblages contenant PHF10, est pertinente pour les études en biologie du cancer et des processus neurodéveloppementaux, où un remodelage de la chromatine altéré et une fidélité transcriptionnelle compromise sont des caractéristiques fréquentes.
PHF10 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PHF10 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PHF10. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PHF10. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PHF10.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.