periaxin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404868

Descripción general

PRX codifica la periaxina, una proteína de andamiaje enriquecida en las células de Schwann que es esencial para la estabilidad y el mantenimiento de la mielina en los nervios periféricos. La periaxina participa en la organización del citoesqueleto y en la arquitectura de los dominios de membrana, favoreciendo la elongación de las células de Schwann y la formación de complejos asociados a la mielina que regulan las interacciones axón–glía. La alteración de PRX perturba la homeostasis de la mielina y la conducción nerviosa, vinculando una función anómala de la periaxina con neuropatías periféricas hereditarias, incluida la enfermedad de Charcot–Marie–Tooth tipo 4F y fenotipos similares a Dejerine–Sottas. En consecuencia, PRX se estudia ampliamente en vías que controlan la mielinización, la diferenciación de las células de Schwann y las respuestas al estrés que influyen en la integridad del nervio periférico.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO periaxin (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PRX en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PRX junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PRX tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína periaxin.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PRX para la investigación de la señalización de periaxin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PRX críticos para la función de periaxin
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PRX para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido periaxin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido periaxin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PRX. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR periaxin (h) y el plásmido HDR periaxin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PRX para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PRX definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.