Plasmide Double Nickase (m) Per2: sc-422193-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Per2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Per2 Double Nickase (m) et le plasmide Per2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Per2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Per2 | sc-422193-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Per2** (Period circadian regulator 2) code un composant central de l’horloge circadienne moléculaire, qui participe à la boucle de rétroaction transcriptionnelle–traductionnelle contrôlant l’expression rythmique des gènes. PER2 forme des complexes avec d’autres protéines de l’horloge afin de moduler l’activité de CLOCK–BMAL1, et façonne ainsi les oscillations impliquées dans le métabolisme, la progression du cycle cellulaire, les réponses aux dommages de l’ADN, ainsi que la signalisation neuronale et endocrinienne. Une altération de la fonction de **Per2** a été associée à une perturbation des rythmes circadiens et à des changements en aval de la signalisation inflammatoire, de l’homéostasie métabolique et des voies de réponse au stress. En recherche biomédicale, **Per2** est fréquemment étudié pour son rôle dans la régulation dépendante du moment des processus physiologiques et pour comprendre comment la dérégulation circadienne influence des phénotypes pertinents pour les maladies dans des modèles murins.
Per2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Per2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Per2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Per2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Per2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.