Plasmide CRISPR/Cas9 KO Per1 (h): sc-401260
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Per1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Per1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Per1 Antibody (E-8): sc-398890
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Per1 (h) | sc-401260 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
PER1 code la protéine Period 1, un composant central de l’horloge circadienne moléculaire qui participe à des boucles de rétroaction transcription–traduction contrôlant l’expression rythmique des gènes sur 24 heures. PER1 interagit avec d’autres régulateurs de l’horloge pour moduler la transcription induite par CLOCK/ARNTL (BMAL1), reliant ainsi le timing circadien au contrôle du cycle cellulaire, aux réponses aux dommages de l’ADN, au métabolisme et à la signalisation hormonale. Par l’intermédiaire de ces réseaux, PER1 influence la coordination temporelle des voies cellulaires de réponse au stress ainsi que l’homéostasie mitochondriale et rédox. Une dérégulation de l’expression de PER1 ou de sa rythmicité a été associée à des altérations de la physiologie veille–sommeil et a été rapportée dans des études portant sur la biologie des cancers, les troubles métaboliques et les mécanismes des maladies neuropsychiatriques.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Per1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène PER1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du PER1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert PER1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Per1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en PER1 pour l'étude de la signalisation de Per1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de PER1 essentiels à la fonction de Per1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de PER1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Per1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Per1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus PER1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Per1 plasmide HDR (h) et le Per1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie PER1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles PER1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.