PELP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-429042

Descripción general

PELP1 (proteína 1 rica en prolina, ácido glutámico y leucina), codificada por el gen Pelp1 del ratón, es un correagulador multifuncional de receptores nucleares y un andamiaje asociado a la cromatina que integra la señalización de hormonas esteroideas con el control transcripcional y epigenético. Coordina interacciones entre la señalización del receptor de estrógeno y los complejos de remodelación de la cromatina, influyendo en la transcripción dependiente de la ARN polimerasa II, las modificaciones de histonas y la progresión del ciclo celular. PELP1 también se conecta con vías de quinasas y respuestas al daño del ADN, vinculando señales de factores de crecimiento con programas de expresión génica y el mantenimiento del genoma. La actividad y localización desreguladas de PELP1 se han asociado con proliferación aberrante, señalización endocrina alterada y redes transcripcionales oncogénicas, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de la biología sensible a hormonas y de vías asociadas a tumores.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PELP1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Pelp1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Pelp1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Pelp1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PELP1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Pelp1 para la investigación de la señalización de PELP1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Pelp1 críticos para la función de PELP1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Pelp1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PELP1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido PELP1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Pelp1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PELP1 (m) y el plásmido HDR PELP1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Pelp1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Pelp1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.