Plásmido Doble Nickase (h) PDGF Receptor beta/PDGFRB: sc-400187-NIC

PDGFRB codifica el receptor beta del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGFRβ), una tirosina quinasa receptora que se une a ligandos PDGF para regular la proliferación, migración y supervivencia de pericitos y células de músculo liso vascular. La dimerización y autofosforilación inducidas por el ligando activan la señalización aguas abajo a través de las vías PI3K–AKT, RAS–MAPK, PLCγ y STAT, coordinando la remodelación del citoesqueleto, la dinámica de la matriz extracelular y el soporte angiogénico de las redes endoteliales. PDGFRB es fundamental para la comunicación entre estroma y vasculatura durante el desarrollo y la remodelación tisular, y se estudia con frecuencia en fibrosis, biología del microambiente tumoral y patologías vasculares. Las alteraciones en la señalización de PDGFRB y sus reordenamientos se han asociado con procesos proliferativos y neoplásicos, lo que lo convierte en un nodo clave para analizar las dependencias de señalización de los receptores de factores de crecimiento.

PDGF Receptor beta/PDGFRB El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PDGFRB en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PDGFRB. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PDGFRB. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PDGFRB alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.