PDE4B Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-422161-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PDE4BO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PDE4B (m) e o Plasmídeo Double Nickase PDE4B (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Pde4b. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PDE4B Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-422161-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PDE4B Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-422161-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **Pde4b** do camundongo codifica a fosfodiesterase 4B (PDE4B), uma fosfodiesterase específica para AMPc que encerra a sinalização ao hidrolisar o AMP cíclico em 5′-AMP. Ao moldar a sinalização compartimentalizada de AMPc/PKA, a PDE4B influencia programas de fosforilação que afetam desfechos transcricionais, como a expressão gênica dependente de CREB, bem como respostas específicas de cada tipo celular à ativação de GPCRs. A atividade da PDE4B é particularmente relevante para redes de sinalização imune e inflamatória, nas quais os níveis de AMPc modulam a produção de citocinas, a ativação de leucócitos e a integração de sinais a jusante de receptores que elevam o AMPc intracelular. A desregulação do controle de AMPc dependente de PDE4B tem sido associada a disfunção imune e a fenótipos neurocomportamentais, tornando-a um alvo útil para estudos mecanísticos em modelos celulares e in vivo de camundongos.
PDE4B O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Pde4b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Pde4b. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Pde4b. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Pde4b interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.