Plasmide Double Nickase (h) PCYOX1: sc-407075-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PCYOX1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PCYOX1 Double Nickase (h) et le plasmide PCYOX1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PCYOX1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PCYOX1 Antibody (25): sc-136391
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PCYOX1 | sc-407075-NIC | 20 µg | $410.00 |
PCYOX1 code la prénylcystéine oxydase 1, une oxydase flavino-dépendante qui catalyse le clivage oxydatif des résidus de prénylcystéine générés lors du renouvellement des protéines prénylées. En métabolisant les dérivés de cystéine prénylée, PCYOX1 contribue à l’homéostasie lipidique et redox et s’inscrit au carrefour de voies liées au trafic membranaire et à la protéostasie. Une activité altérée de PCYOX1 a été associée à des phénotypes de stress oxydant et à la signalisation inflammatoire, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude des dysfonctionnements métaboliques et de la biologie vasculaire. Dans les cellules humaines, la perturbation de PCYOX1 constitue un point d’entrée exploitable pour examiner comment les sous-produits de la prénylation influencent la gestion des espèces réactives de l’oxygène et les voies de réponse au stress en aval.
PCYOX1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PCYOX1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PCYOX1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PCYOX1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PCYOX1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.