Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PATZ1 Double Nickase Plasmid (h): sc-404881-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das PATZ1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- PATZ1 Double-Nickase-Plasmid (h) und PATZ1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf PATZ1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: PATZ1: sc-393223
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
PATZ1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-404881-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PATZ1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-404881-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PATZ1 (POZ/BTB- und AT-hook-haltendes Zinkfingerprotein 1) ist ein nukleärer Transkriptionsfaktor, der über Zinkfinger- und AT-hook-Motive an AT-reiche DNA bindet und Genexpressionsprogramme reguliert, die Proliferation, Differenzierung und Apoptose steuern. Es wirkt innerhalb chromatinassoziierter regulatorischer Netzwerke, indem es transkriptionelle Repression und Aktivierung moduliert, einschließlich Crosstalk mit p53-abhängigen Antworten und anderen entwicklungsbiologischen Transkriptionsschaltkreisen. Eine fehlregulierte PATZ1-Expression oder -Aktivität wurde mit veränderten Zellschicksalsentscheidungen und genomischer Stabilität in Verbindung gebracht; entsprechende Assoziationen wurden in mehreren Tumorkontexten sowie bei neuroentwicklungsbezogenen Phänotypen beschrieben. Diese Eigenschaften machen PATZ1 zu einem nützlichen Ziel, um Transkriptionskontrolle, Linienfestlegung und Stressantwort-Signalwege in humanen Zellmodellen zu untersuchen.
PATZ1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des PATZ1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von PATZ1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die PATZ1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit PATZ1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.