Plasmide Double Nickase (h) PARP-7: sc-407777-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PARP-7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PARP-7 Double Nickase (h) et le plasmide PARP-7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TIPARP. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PARP-7 | sc-407777-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PARP-7 | sc-407777-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TIPARP code PARP-7, une mono‑ADP‑ribosyltransférase qui catalyse la MARylation de substrats protéiques afin de moduler la signalisation, les programmes transcriptionnels et la protéostasie. PARP‑7 est induite par l’activité du récepteur des hydrocarbures aromatiques (AHR) et agit au sein des voies de réponse aux xénobiotiques, en assurant un contrôle par rétroaction de l’expression génique dépendante du récepteur et des réponses adaptatives au stress. En régulant la signalisation associée à l’interféron, la dynamique ubiquitine–protéasome et les complexes transcriptionnels nucléaires, PARP‑7 influence le niveau de base de l’immunité innée et l’adaptation cellulaire aux signaux environnementaux. Une activité TIPARP/PARP‑7 dérégulée a été associée dans la littérature à une altération de la signalisation inflammatoire et à des phénotypes oncogéniques, ce qui souligne son intérêt pour des études mécanistiques en biologie du cancer et en régulation immunitaire.
PARP-7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TIPARP dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TIPARP. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TIPARP. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TIPARP.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.