Plasmide CRISPR/Cas9 KO PARP-4 (h): sc-406615
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- PARP-4 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique PARP-4, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PARP-4 Antibody (B-11): sc-515898
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO PARP-4 (h) | sc-406615 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
PARP4 code pour le membre 4 de la famille des poly(ADP-ribose) polymérases (PARP‑4), une ADP‑ribosyltransférase impliquée dans les réponses cellulaires aux dommages de l’ADN et au stress génotoxique. PARP‑4 est associée à la régulation de la dynamique de la chromatine et au maintien de l’intégrité du génome via une signalisation dépendante de la poly(ADP‑ribosyl)ation, à l’interface des voies de réparation de l’ADN et des points de contrôle du cycle cellulaire. Des altérations de l’activité ou de l’expression de PARP4 ont été rapportées dans de multiples jeux de données liés au cancer, ce qui étaye sa pertinence pour l’étude de la tolérance tumorale aux dommages de l’ADN et de l’adaptation au stress. PARP‑4 est également utilisée comme nœud mécanistique pour explorer les interactions entre l’ADP‑ribosylation, le stress de réplication et la régulation transcriptionnelle dans les cellules humaines.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO PARP-4 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène PARP4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du PARP4, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert PARP4 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine PARP-4.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en PARP4 pour l'étude de la signalisation de PARP-4, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de PARP4 essentiels à la fonction de PARP-4
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de PARP4 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le PARP-4 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le PARP-4 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus PARP4. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le PARP-4 plasmide HDR (h) et le PARP-4 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie PARP4 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles PARP4 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.