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Plasmide Double Nickase (m) PARP-2 | sc-419019-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Parp2** code **PARP‑2**, un capteur des dommages à l’ADN et une poly(ADP‑ribose) polymérase qui contribue au maintien du génome en catalysant l’ADP‑ribosylation de protéines associées à la chromatine. PARP‑2 participe à la réparation par excision de bases et à la réparation des cassures simple brin, en coordonnant le recrutement des facteurs de réparation, le remodelage de la chromatine et le rétablissement de l’intégrité de la réplication. Grâce à des interactions fonctionnelles avec PARP‑1, les complexes de réparation associés à XRCC1 et les voies de signalisation du stress, PARP‑2 aide à moduler les points de contrôle du cycle cellulaire et les réponses cellulaires au stress génotoxique. Une activité de PARP‑2 dérégulée ou une dynamique de PARylation altérée est pertinente pour les études sur l’instabilité génomique, la signalisation inflammatoire et la biologie du cancer dans des modèles murins.
PARP-2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Parp2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Parp2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Parp2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Parp2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.