PARD3B CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406097

Übersicht

PARD3B (PAR-3-Familie, Zellpolaritätsregulator Beta) ist ein Gerüstprotein, das zur Etablierung und Aufrechterhaltung der apikal-basolateralen Polarität in Epithelzellen beiträgt, indem es Polaritätskomplexe an Tight Junctions organisiert. Es wirkt innerhalb konservierter Polaritätsnetzwerke, an denen PAR-Proteine und die Signalgebung kleiner GTPasen beteiligt sind, um eine asymmetrische Proteinlokalisation, die Integrität von Zell-Zell-Kontakten und die Organisation des Zytoskeletts zu koordinieren. Über diese Prozesse beeinflusst PARD3B Zellmigration, Gewebearchitektur und die räumliche Kompartimentierung von Signalwegen, die Proliferations- und Differenzierungsprogramme modulieren können. Eine Dysregulation von Polaritätsregulatoren, einschließlich PARD3B-assoziierter Signalwege, wird häufig im Zusammenhang mit epithelialer Desorganisation, invasionsassoziierten Phänotypen und anderen krankheitsrelevanten zellulären Zuständen untersucht.

Das PARD3B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des PARD3B-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des PARD3B-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von PARD3B nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die PARD3B-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von PARD3B-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der PARD3B-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf PARD3B-Exone abzielen, die für die PARD3B-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere PARD3B-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom PARD3B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom PARD3B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des PARD3B-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das PARD3B HDR-Plasmid (h) und PARD3B HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von PARD3B-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten PARD3B-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.