PAPP-A CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422113

개요

마우스 Pappa는 임신 관련 혈장 단백질 A(PAPP-A)를 암호화하며, PAPP-A는 분비형 금속단백분해효소로서 인슐린유사성장인자 결합단백질(IGF 결합단백질)을 절단합니다. 특히 IGFBP4를 가장 두드러지게 절단하여 국소적인 IGF의 생체이용률을 증가시킵니다. PAPP-A는 IGF1R을 통한 IGF1/IGF2 신호와 그 하위의 PI3K–AKT 및 MAPK 연쇄반응을 조절함으로써 세포 증식, 생존, 분화, 그리고 세포외기질 재구성에 영향을 미칩니다. PAPP-A 활성은 태반 및 생식 생물학, 혈관 평활근의 특성, 조직 복구와 같은 과정과 연관되어 있어 성장 조절과 염증 관련 재형성의 기전 연구에서 중요하게 다뤄집니다. PAPP-A가 관여하는 IGF 축 조절의 이상은 임상적 결과를 의미하지 않는 범위에서 대사 기능 장애, 심혈관 병리, 그리고 암 관련 기질 상호작용 모델에서 자주 검토됩니다.

PAPP-A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Pappa 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Pappa 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Pappa의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PAPP-A 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PAPP-A 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Pappa 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PAPP-A 기능에 중요한 Pappa 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Pappa 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PAPP-A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 PAPP-A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Pappa 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PAPP-A HDR 플라스미드 (m) 및 PAPP-A HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Pappa 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Pappa 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.