Plasmide Double Nickase (h) PANK2: sc-405120-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PANK2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PANK2 Double Nickase (h) et le plasmide PANK2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PANK2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PANK2 | sc-405120-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PANK2 | sc-405120-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La pantothénate kinase 2 (PANK2) est une enzyme mitochondriale qui catalyse la première étape, limitante, de la biosynthèse de la coenzyme A (CoA) à partir du pantothénate, reliant la disponibilité de la vitamine B5 à la production cellulaire d’acyl-CoA et au métabolisme énergétique. En régulant les réserves de CoA, PANK2 influence la fonction mitochondriale, le métabolisme lipidique et l’homéostasie rédox, avec des effets en aval sur des voies telles que la β‑oxydation des acides gras et le cycle de l’acide tricarboxylique (cycle de Krebs). Une dérégulation de l’activité ou de l’expression de PANK2 est associée à une altération des flux métaboliques et à un stress mitochondrial, et PANK2 est largement étudiée dans le contexte de la neurodégénérescence et des phénotypes liés à la gestion du fer, notamment la neurodégénérescence associée à la pantothénate kinase (PKAN). Ces caractéristiques font de PANK2 une cible utile pour étudier le contrôle métabolique mitochondrial et la signalisation de réponse au stress dans des systèmes cellulaires humains.
PANK2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PANK2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PANK2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PANK2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PANK2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.