Plasmide Double Nickase (h) PABPC4: sc-411206-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PABPC4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PABPC4 Double Nickase (h) et le plasmide PABPC4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PABPC4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PABPC4 | sc-411206-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PABPC4 | sc-411206-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PABPC4 (protéine cytoplasmique 4 se liant à la poly(A)) est une protéine de liaison à l’ARN qui s’associe aux queues poly(A) des ARNm matures afin de réguler la stabilité des transcrits, l’initiation de la traduction et le renouvellement (turnover) des ARNm dans le cytoplasme. En s’intégrant aux complexes centraux de ribonucléoprotéines messagères (mRNP) et en interagissant avec des facteurs de traduction, PABPC4 contribue à coordonner des programmes d’expression génique post-transcriptionnels qui façonnent l’activation cellulaire et les réponses au stress. PABPC4 a été étudiée dans le contexte de la biologie hématopoïétique et immunitaire, où des altérations du traitement des ARNm et du contrôle de la traduction peuvent contribuer à une prolifération dérégulée et à des signalisations inflammatoires. La perturbation de la dynamique des mRNP dépendante de PABPC4 est également pertinente pour l’étude des mécanismes de maladie liés à un métabolisme de l’ARN aberrant.
PABPC4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PABPC4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PABPC4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PABPC4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PABPC4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.