p68 RNA Helicase CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402401

개요

DDX5는 p68 RNA 헬리케이스를 암호화하며, 이는 DEAD-box 계열의 ATP 의존적 RNA 헬리케이스로서 RNA 및 리보핵단백질 복합체를 재구성하여 pre-mRNA 스플라이싱, 리보솜 생합성, 마이크로RNA 처리 과정을 조절합니다. p68은 또한 신호에 반응하는 전사인자들과 상호작용함으로써 전사 공동조절인자로 기능하여, RNA 대사를 세포주기 진행과 스트레스 반응을 관장하는 유전자 발현 프로그램과 연결합니다. 이러한 기능을 통해 DDX5는 유전체 무결성 유지와 DNA 손상 반응을 RNA 처리와 조율하는 데 기여합니다. DDX5의 발현 또는 기능 이상은 여러 종양 맥락에서 종양유발성 전사 네트워크 및 변화된 RNA 스플라이싱 양상과 연관되어 왔으며, RNA에 의해 유도되는 질병 표현형의 기전을 연구하는 데 유용한 핵심 노드로 여겨집니다.

p68 RNA Helicase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 DDX5 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 DDX5 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 DDX5의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 p68 RNA Helicase 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 p68 RNA Helicase 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 DDX5 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• p68 RNA Helicase 기능에 중요한 DDX5 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 DDX5 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• p68 RNA Helicase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 p68 RNA Helicase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 DDX5 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  p68 RNA Helicase HDR 플라스미드 (h) 및 p68 RNA Helicase HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 DDX5 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 DDX5 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.