Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (h) P5CRL: sc-406033-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) P5CRL correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide P5CRL Double Nickase (h) et le plasmide P5CRL Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PYCRL. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: P5CRL Antibody (E-63): sc-100487
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) P5CRL | sc-406033-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **PYCRL** code une protéine apparentée à la pyrroline-5-carboxylate réductase (P5CRL), une enzyme cytosolique associée à la biosynthèse de la proline et, plus largement, au métabolisme rédox des acides aminés via la réduction du pyrroline-5-carboxylate dépendante du NAD(P)H. En modulant le cycle proline–P5C, l’activité de PYCRL peut influencer l’équilibre rédox cellulaire, le couplage métabolique mitochondrie–cytosol et des processus d’adaptation au stress qui recoupent la régulation de la matrice extracellulaire et la protéostasie. Les perturbations du métabolisme de la proline sont fréquemment associées à des modifications de la prolifération et des réponses au stress oxydant, ce qui fait de PYCRL une cible pertinente pour des études mécanistiques du remodelage métabolique dans des contextes liés aux maladies. L’étude de PYCRL soutient également les recherches visant à comprendre comment le métabolisme des acides aminés s’intègre aux voies centrales du carbone et à la signalisation du stress cellulaire.
P5CRL Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PYCRL dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PYCRL. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PYCRL. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PYCRL.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.