Plasmide Double Nickase (m) p38 alpha MAPK14: sc-424051-NIC

La Mapk14 murine code p38α (MAPK14), une kinase sérine/thréonine activée par le stress qui intègre les cytokines inflammatoires, le stress oxydatif et les stimuli environnementaux afin de moduler les réponses cellulaires. p38α agit dans la cascade de signalisation des MAPK, en régulant des programmes de phosphorylation qui contrôlent la transcription, la stabilité de l’ARNm, l’apoptose, la différenciation et les points de contrôle du cycle cellulaire via des cibles en aval telles que MAPKAPK2/3 et des facteurs de transcription dont ATF2 et CREB. Dans les compartiments immunitaire et stromal, MAPK14 contribue à la production de cytokines et à la signalisation de l’immunité innée, reliant les réponses au stress cellulaire à l’homéostasie tissulaire. Une activité dérégulée de p38α a été impliquée dans des physiopathologies associées à l’inflammation, des processus neuro-inflammatoires et la biologie du microenvironnement tumoral, ce qui étaye son utilisation dans des études mécanistiques au sein de divers modèles murins de maladie.

p38 alpha MAPK14 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Mapk14 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Mapk14. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Mapk14. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Mapk14.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.