Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) p300: sc-435902-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) p300 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide p300 Double Nickase (m) et le plasmide p300 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Ep300. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: p300 Antibody (F-4): sc-48343
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) p300 | sc-435902-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) p300 | sc-435902-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’Ep300 de la souris code p300, une lysine acétyltransférase et coactivateur transcriptionnel à large spectre, qui acétyle des histones et des substrats non histones afin de moduler l’accessibilité de la chromatine et les programmes d’expression génique. p300 intègre des signaux provenant de multiples facteurs de transcription et contribue au fonctionnement des enhancers, au contrôle du cycle cellulaire, aux réponses aux dommages de l’ADN et à la différenciation spécifique de lignée. En modulant des réseaux transcriptionnels dépendants de l’acétylation, p300 influence des voies telles que les réponses au stress régulées par p53, la signalisation TGF-β/SMAD et la régulation des gènes inflammatoires. Une activité d’EP300 dérégulée a été associée à des états épigénétiques altérés et à un remodelage transcriptionnel observés dans divers contextes pertinents pour la maladie, notamment en cancérologie, dans des troubles du développement et dans les dysfonctions immunitaires.
p300 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ep300 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ep300. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ep300. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ep300.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.