Plásmido Doble Nickase (h) p20-ARC: sc-405006-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)p20-ARC consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa p20-ARC (h) y el plásmido de doble nickasa p20-ARC (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ARPC4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) p20-ARC | sc-405006-NIC | 20 µg | $410.00 |
ARPC4 codifica p20-ARC, una subunidad central del complejo Arp2/3 que inicia la nucleación de redes ramificadas de filamentos de actina, necesarias para la formación de lamelipodios, el “ruffling” de membrana y la remodelación dinámica del citoesqueleto. Mediante la regulación de la polimerización de actina, p20-ARC contribuye a procesos como la migración celular, la adhesión, la endocitosis y la fagocitosis, integrando señales de GTPasas de la familia Rho y de factores promotores de la nucleación para controlar la generación de fuerza dependiente de actina. La actividad desregulada de Arp2/3 y la dinámica anómala de la actina se han asociado con fenotipos de motilidad e invasión celular alterados, lo que respalda a ARPC4 como un objetivo útil para estudiar cambios impulsados por el citoesqueleto relevantes para el comportamiento de células cancerosas y para la función neurodel desarrollo o de células inmunitarias.
p20-ARC El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ARPC4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ARPC4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ARPC4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ARPC4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.